雜志名稱：Circulation research

?

文獻題目：Ko T M, Kuo H C, Chang J S, etal. CXCL10/IP-10 is a Biomarker and Mediator for Kawasaki Disease[J].Circulation research, 2015, 116(5): 876-883.

?

第一作者：Tai-Ming Ko

作者單位：Institute of Biomedical Sciences ?and Institute of Cellular and Organismic?Biology

本實驗所用產品：RayBiotech?AAH-CYT-G8抗體芯片

實驗樣品：血漿

?

研究背景：

??川崎病（Kawasaki diseaes）又稱皮膚粘膜淋巴結綜合癥（MCLS），是一種以全身血管炎變為主要病理的急性發熱性出疹性小兒疾病。由于本病可發生嚴重心血管病變，引起人們重視，近年發病增多，川崎病已取代風濕熱為我國小兒后天性心臟病的主要病因之一。目前認為川崎病是一種免疫介導的血管炎，目前對于KD的診斷非常的困難，本研究的目的是尋找一個生物標志物用于早期診斷。收集214個小兒發燒且有KD臨床特征的血漿樣本，其中100例確診為KD。用抗體芯片篩查生物標志物，本論文分為3個階段：發現、重復驗證和盲法驗證；在發現階段，IL-17F, sCD40L, E-selectin, CCL23, CXCL10/IP-10在KD組顯著上調，其中IP10的ROC分析結果顯示IP-10對于診斷KD有很好的靈敏度和特異性。盲法驗證也表明IP-10是KD的一個非常好的生物標志物。后續研究證明通過治療后，KD病人的IP-10恢復正常水平，下游的IP-10受體以及CXCR3 在KD病人的T細胞中被激活。IP-10可以作為KD的一個便利的診斷標志物，且對KD的發病機制研究提供重要線索。

1?分組

KD病人血漿樣品

非KD發熱對照血漿樣品

2?結果

2.1?RayBiotech抗體芯片篩查KD病人與對照血漿細胞因子差異

????RayBiotech人細胞因子抗體芯片檢測篩查KD病人與對照血漿細胞因子差異，結果發現IL-9, IP-10, E-selectin, MPIF-1四個細胞因子在KD病人血漿中表達量升高，加大樣品數量采用RayBiotech的ELISA驗證，發現IL-9隨著樣品數量增多顯著性差異消失，而IP-10, E-selectin, MPIF-1仍然是在KD組顯著性升高。

2.2 ?IP-10的重復驗證和ROC分析

????在幾個候選生物標志物中，IP-10的變化幅度最大且統計學差異最為顯著。加多樣品數量再次驗證，且ROC分析IP-10作為KD診斷標志物，靈敏度100%，特異性77%，線下面積AUC=0.94，具有非常好的判別效果。

2.3?IP-10作為診斷標志物的盲測驗證

????盲法驗證實驗結果顯示，IP-10 cutoff 值 1318 pg/mL可以很好的分辨23個KD病人和37個 non-KD 發熱對照(sensitivity, 96% [22/23]; specificity, 81% [30/37])。

2.4?血漿IP-10水平與發熱時間以及IVIG治療前后的關系

????IP-10 cutoff值1318 pg/mL，81%?KD病人可以在早期 (<4 days)被診斷出來, 96% KD病人可以在急性期(>5 days)被診斷出來。在IVIG治療后，44例病人的IP-10水平恢復正常水平，而只有1例病人的IP-10在第一次治療后沒有變化，需要第二次治療。

2.5?IP-10與KD的病理研究的關系

????IP-10可以下調T細胞表面CXCR3，為檢測KD病人血漿中上調的IP-10對下游的機制影響，分析KD病人T細胞表面的CXCR3的水平變化，KD病人CXCR3表達量比正常對照表達量增加3.3倍，說明IP-10可能激活CXCR3信號通路，對KD的發生和發展起到關鍵作用。

3?結論

RayBiotech芯片的篩查結果為KD尋找到非常重要且便利的血漿生物標志物IP-10，且為KD病理研究和治療研究提供重要研究線索。